Comment sont des anticorps mesurés

? Anticorps sont des protéines immunitaires appelées immunoglobulines qui sont produites en réponse à la détection d’un objet ou d’un antigène étranger , tels que des bactéries , des virus ou des cellules cancéreuses. Il ya cinq grands types d’immunoglobulines dans le corps : IgA , IgG , IgM , IgD et IgE . Niveaux pour chaque type d’anticorps sont mesurés pour tester et traiter le cancer ou d’autres maladies infectieuses . Il existe plusieurs types de méthodes utilisées pour mesurer les anticorps pour le chercheur ou besoins médicaux . Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) est utilisée pour déterminer la quantité d’anticorps ou de la quantité de protéine liée à l’anticorps dans un échantillon de sang . Le test utilise l’ interaction antigène /anticorps , où les complexes antigène et forment des anticorps. L’antigène ou l’ anticorps dans l’échantillon sont marqués avec une enzyme. Une fois que les complexes antigène et forment des anticorps , ils sont capables d’être détecté sur une plaque ELISA . L’enzyme sur le complexe réagit avec un substrat pour former un produit coloré qui peut être compté sur un compteur de plaque afin de déterminer la quantité d’anticorps présents dans l’échantillon .
Western Blot Photos

La technique de Western Blot est utilisé pour déterminer à la fois le poids moléculaire d ‘anticorps et les quantités relatives d’ anticorps présents dans un échantillon. Des techniques de Western blot utilise une électrophorèse sur gel pour séparer les anticorps . Les anticorps sont transférées à une feuille de nitrocellulose et incubées avec des protéines génériques. Une solution contenant les enzymes est ajoutée à se lier à des anticorps spécifiques. Substrat est ajouté et les anticorps sont incubés à convertir les complexes anticorps /enzyme en un produit coloré qui peut être consulté et photographié afin de déterminer la quantité d’anticorps présents .

Fluorescence cytométrie en flux

fluorescence cytométrie en flux est une technique qui est capable de compter des anticorps par la mesure des propriétés cellulaires et d’anticorps fluorescents . Un laser passe à travers les cellules et les mesures sont déterminées par des changements de dispersion de la lumière , l’absorption de lumière et d’ émission de lumière, qui passe dans des détecteurs de l’échantillon. La lumière change qui en résultent sont transférés à un logiciel informatique et manipulés en signaux numériques qui sont affichés dans un graphique afin d’obtenir le nombre de cellules spécifiques pour les différents types de cellules , comme des anticorps .
Hémocytomètre
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numérations cellulaires sur les anticorps peuvent être effectuées en utilisant un hématimètre . Une solution de l’échantillon sanguin est préparé dans un tube Eppendorf en utilisant une pipette . Solution de bleu trypan est ajouté à la solution pour marquer les cellules mortes et le mélange à ajouter à l’ hémocytomètre . Le haemocytomètre contient des lignes de la grille dans laquelle les numérations cellulaires sont effectuées à l’aide d’un compteur manuel tout en regardant les lignes de la grille à 10X puissance d’un microscope composé .